Plásmido Doble Nickase (h) GPR39: sc-410802-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GPR39 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GPR39 (h) y el plásmido de doble nickasa GPR39 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GPR39. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GPR39 | sc-410802-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GPR39 | sc-410802-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR39 codifica un receptor acoplado a proteínas G activado por zinc, predominantemente asociado a la señalización mediada por Gαq/11 y Gαs, integrando señales extracelulares en respuestas de segundos mensajeros como la activación de la fosfolipasa C, la movilización de Ca2+ intracelular y la producción de AMPc. A través de estas vías, GPR39 puede influir en programas transcripcionales que regulan la supervivencia y proliferación celular, la función de barrera epitelial y endotelial, y la homeostasis metabólica. Este receptor se ha estudiado en contextos como la fisiología gastrointestinal, la señalización inflamatoria y la regulación neuroendocrina, donde las alteraciones en la dinámica de señalización de los GPCR pueden remodelar las respuestas tisulares al estrés. La desregulación de la señalización asociada a GPR39 se ha investigado en múltiples procesos relevantes para enfermedades, lo que lo convierte en un objetivo útil para estudios mecanísticos de la detección de zinc, la desensibilización de GPCR y las cascadas de quinasas aguas abajo.
GPR39 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GPR39 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GPR39. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GPR39. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GPR39 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.