GPR126 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407085

Übersicht

ADGRG6 (GPR126) kodiert einen Adhäsions‑G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor, der Signale aus der extrazellulären Matrix und aus Zell‑Zell‑Kontakten integriert und dadurch die Signalübertragung über heterotrimere G‑Proteine reguliert, einschließlich cAMP/PKA‑abhängiger Signalwege. GPR126 ist ein zentraler Regulator der Schwann‑Zell‑Entwicklung und der Myelinisierung und trägt zur Reifung peripherer Nerven bei; darüber hinaus spielt es eine Rolle in der Knorpelbiologie, im Skelettwachstum und in der Gefäßentwicklung. Über seine große extrazelluläre Domäne und die Autoproteolyse an der GPCR‑Proteolysestelle beeinflusst GPR126 mechanosensitive und entwicklungsbiologische Signalprogramme. Genetische und funktionelle Störungen von ADGRG6 wurden mit neuroentwicklungsbezogenen und muskuloskelettalen Phänotypen in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für die Untersuchung von Myelinisierung, Zelldifferenzierung und Gewebemorphogenese unterstreicht.

Das GPR126 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ADGRG6-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ADGRG6-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ADGRG6 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die GPR126-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ADGRG6-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der GPR126-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ADGRG6-Exone abzielen, die für die GPR126-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ADGRG6-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom GPR126 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom GPR126 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ADGRG6-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das GPR126 HDR-Plasmid (h) und GPR126 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ADGRG6-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ADGRG6-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.