GPR119 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433515

Descripción general

Gpr119 codifica GPR119, un GPCR de clase A enriquecido en las células de los islotes pancreáticos y en poblaciones enteroendocrinas intestinales, donde se acopla principalmente a la señalización mediada por Gs para elevar el cAMP intracelular. Esta vía sustenta respuestas de detección de nutrientes que influyen en la liberación de incretinas, la dinámica de secreción de insulina y la regulación más amplia de la homeostasis de la glucosa y los lípidos. En tejidos inmunitarios y metabólicos, la señalización dependiente de GPR119 se ha relacionado con la modulación del equilibrio energético celular y con la comunicación hormonal entre el intestino y el páncreas. Por ello, la desregulación de las redes asociadas a GPR119 se estudia en el contexto de fenotipos metabólicos, incluidas vías relevantes para la obesidad y la diabetes, así como la función de las células endocrinas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GPR119 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Gpr119 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Gpr119 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Gpr119 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GPR119.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Gpr119 para la investigación de la señalización de GPR119, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Gpr119 críticos para la función de GPR119
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Gpr119 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GPR119 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido GPR119 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Gpr119. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GPR119 (m) y el plásmido HDR GPR119 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Gpr119 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Gpr119 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.