Plásmido Doble Nickase (h) GNL3L: sc-412308-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GNL3L consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GNL3L (h) y el plásmido de doble nickasa GNL3L (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GNL3L. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GNL3L | sc-412308-NIC | 20 µg | $410.00 |
GNL3L (proteína similar a la proteína de unión a nucleótidos de guanina 3-like) es una proteína nucleolar que se une a GTP, implicada en la biogénesis de los ribosomas y la organización del nucléolo, con funciones en la regulación de la progresión del ciclo celular y la proliferación. Participa en el procesamiento de ARN y en el ensamblaje de complejos ribonucleoproteicos, conectando la función nucleolar con programas de control del crecimiento. Se ha descrito una expresión alterada de GNL3L en contextos proliferativos y se estudia en relación con la biología tumoral y las respuestas al estrés celular que afectan la homeostasis nucleolar. Estas características hacen de GNL3L un objetivo útil para investigar cómo las GTPasas nucleolares coordinan la producción de ribosomas con decisiones sobre el destino celular.
GNL3L El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GNL3L en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GNL3L. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GNL3L. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GNL3L alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.