GMD Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410794-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GMDO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GMD (h) e o Plasmídeo Double Nickase GMD (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GMDS. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GMD Anticorpo (C-7): sc-515226
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GMD Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410794-NIC | 20 µg | $410.00 |
O GMDS humano codifica a GDP-manose 4,6-desidratase (GMD), uma enzima citosólica que catalisa a primeira etapa comprometida na biossíntese de novo de GDP‑L‑fucose a partir de GDP‑manose. Essa via fornece GDP‑fucose para reações de fucosiltransferases que geram glicanos fucosilados em glicoproteínas e glicolipídios, moldando a sinalização de receptores na superfície celular, a adesão de leucócitos e o tráfego celular por meio da modulação de interações glicano–lectina. A atividade de GMDS influencia programas de glicosilação mediados pelo Golgi, incluindo a formação de ligantes de selectinas e a maturação mais ampla de glicoproteínas, o que pode afetar proliferação, reconhecimento imune e respostas ao estresse. Alterações na fucosilação associadas à desregulação de GMDS têm sido relacionadas a fenótipos relevantes para doenças em biologia do câncer e imunologia, tornando o GMDS um nó útil para estudar a regulação da comunicação celular dependente de glicanos.
GMD O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GMDS em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GMDS. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GMDS. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GMDS interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.