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GM130慢病毒激活颗粒(h) | sc-400787-LAC | 200 µl | $455.00 |
GOLGA2 编码顺面高尔基体(cis-Golgi)基质蛋白 GM130。GM130 是一种外周膜系留因子,有助于组织高尔基体带状结构并维持扁平囊堆叠。GM130 通过与 p115/USO1 及其他 golgin 蛋白的相互作用协调囊泡捕获与融合,支持依赖 COPI/COPII 的转运,并参与中心体定位、微管组织以及细胞极性建立。由于其在分泌通路通量与高尔基体完整性中的作用,GM130 功能的改变与细胞应激反应、迁移,以及在增殖性和神经退行性疾病模型中常见的高尔基体碎裂与转运失衡相关表型有关。这些过程使 GOLGA2 成为研究膜转运、细胞器生物发生以及与蛋白质稳态和细胞周期调控相关信号通路的一个有用节点。
GM130 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 GOLGA2 表达。
GM130 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在GOLGA2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性GM130表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 GOLGA2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。