Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
GM130 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400787-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GM130O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GM130 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GM130 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GOLGA2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GM130 Anticorpo (H-7): sc-55590
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GM130 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400787-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GM130 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400787-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GOLGA2 codifica a proteína da matriz do cis-Golgi GM130, um arcabouço central para a organização da fita do Golgi e para o ancoramento (tethering) de vesículas, o que sustenta um transporte eficiente do RE para o Golgi e o empilhamento das cisternas. A GM130 coordena-se com fatores de ancoramento e redes de tráfego reguladas por pequenas GTPases para manter a arquitetura do Golgi durante a intérfase e promover a remontagem do Golgi após a mitose, influenciando a secreção polarizada e o posicionamento de organelos. Por meio de seus papéis no tráfego de membranas, no processamento de proteínas e na dinâmica do Golgi ligada ao ciclo celular, alterações na função da GM130 são relevantes para respostas ao estresse celular, fenótipos de migração e perturbações na estrutura do Golgi associadas a doenças, relatadas em múltiplos contextos biológicos.
GM130 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GOLGA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GOLGA2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GOLGA2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GOLGA2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.