Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO GM-CSFRα (m2): sc-419841-KO-2
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- GM-CSFRα Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique GM-CSFRα, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GM-CSFRα Antibody (S-50): sc-456
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO GM-CSFRα (m2) | sc-419841-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Csf2ra code la chaîne alpha du récepteur du facteur de stimulation des colonies de granulocytes-macrophages (GM-CSFRα), qui confère la spécificité de liaison au ligand et s’associe à la chaîne bêta commune pour initier la signalisation dans les cellules myéloïdes. Après fixation du GM-CSF, ce complexe récepteur active les voies JAK2/STAT5, MAPK/ERK et PI3K/AKT afin de réguler la prolifération, la survie, la différenciation et l’activation fonctionnelle des granulocytes et des macrophages. La signalisation dépendante de GM-CSFRα influence les programmes de cytokines inflammatoires et l’homéostasie des cellules immunitaires innées dans l’ensemble des tissus hématopoïétiques. La dérégulation de l’axe GM-CSF est impliquée dans l’inflammation d’origine immunitaire et les dysfonctionnements myéloïdes, faisant de Csf2ra un nœud pertinent pour des études mécanistiques dans des modèles de maladies inflammatoires et hématopoïétiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO GM-CSFRα (m2) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Csf2ra dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Csf2ra, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Csf2ra à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine GM-CSFRα.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Csf2ra pour l'étude de la signalisation de GM-CSFRα, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Csf2ra essentiels à la fonction de GM-CSFRα
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Csf2ra pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le GM-CSFRα plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le GM-CSFRα plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Csf2ra. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le GM-CSFRα plasmide HDR (m) et le GM-CSFRα (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Csf2ra pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Csf2ra définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.