Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GM-CSFRα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-419841-KO-2
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GM-CSFRα El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GM-CSFRα, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GM-CSFRα Anticuerpo (S-50): sc-456
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GM-CSFRα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2) | sc-419841-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Csf2ra codifica la cadena alfa del receptor del factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSFRα), que confiere especificidad de unión al ligando y se asocia con la cadena beta común para iniciar la señalización en células mieloides. Tras la unión de GM-CSF, este complejo receptor activa las vías JAK2/STAT5, MAPK/ERK y PI3K/AKT para regular la proliferación, la supervivencia, la diferenciación y la activación funcional de granulocitos y macrófagos. La señalización dependiente de GM-CSFRα influye en los programas de citocinas inflamatorias y en la homeostasis de las células inmunitarias innatas en los tejidos hematopoyéticos. La desregulación del eje GM-CSF se ha implicado en la inflamación mediada por el sistema inmunitario y en la disfunción mieloide, lo que convierte a Csf2ra en un nodo relevante para estudios mecanísticos en modelos de enfermedades inflamatorias y hematopoyéticas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GM-CSFRα (m2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Csf2ra en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Csf2ra junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Csf2ra tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GM-CSFRα.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Csf2ra para la investigación de la señalización de GM-CSFRα, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Csf2ra críticos para la función de GM-CSFRα
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Csf2ra para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GM-CSFRα CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido GM-CSFRα CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Csf2ra. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GM-CSFRα (m) y el plásmido HDR GM-CSFRα (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Csf2ra para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Csf2ra definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.