Glucose Transporter Glut5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-425193
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Glucose Transporter Glut5 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Glucose Transporter Glut5-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Glucose Transporter Glut5: sc-271055
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Glucose Transporter Glut5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-425193 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Slc2a5 kodiert den Glukosetransporter Glut5 (GLUT5), einen erleichterten Hexose-Transporter mit hoher Spezifität für Fruktose, der die apikale Fruktoseaufnahme vermittelt und zur Kohlenhydratverwertung im Darmepithel und anderen Geweben beiträgt. Durch die Regulation des Fruktoseeinstroms unterstützt GLUT5 den zellulären Energiestoffwechsel und beeinflusst den glykolytischen Fluss sowie nachgeschaltete Lipidsynthesewege, wodurch die Nährstoffverfügbarkeit mit metabolischer Umprogrammierung verknüpft wird. Eine veränderte SLC2A5/GLUT5-Expression wurde mit ernährungsabhängigen metabolischen Phänotypen in Verbindung gebracht und wird häufig im Kontext der intestinalen Resorption, des hepatischen Stoffwechsels und der Nährstoffnutzung durch Tumorzellen untersucht. In Mausmodellen dient Slc2a5 als gut untersuchbarer Ansatzpunkt, um zu erforschen, wie der Fruktosetransport die systemische Energiebilanz und den mikroenvironmentalen metabolischen Stress prägt.
Das Glucose Transporter Glut5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Slc2a5-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Slc2a5-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Slc2a5 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Glucose Transporter Glut5-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Slc2a5-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Glucose Transporter Glut5-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Slc2a5-Exone abzielen, die für die Glucose Transporter Glut5-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Slc2a5-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Glucose Transporter Glut5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Glucose Transporter Glut5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Slc2a5-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Glucose Transporter Glut5 HDR-Plasmid (m) und Glucose Transporter Glut5 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Slc2a5-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Slc2a5-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.