Glucose Transporter Glut2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400347

概要

SLC2A2はグルコーストランスポーター2（GLUT2）をコードしており、濃度勾配に依存して細胞膜を介したグルコースの双方向性フラックスを仲介する促進拡散型のヘキソーストランスポーターです。ヒト組織では、GLUT2はグルコースの取り込みと放出を支えることで栄養センシングと代謝恒常性に寄与し、解糖系、糖新生、インスリン分泌動態に関連する下流経路にも影響を与えます。SLC2A2の発現や機能の変化はグルコース処理の破綻や代謝表現型と関連づけられており、糖尿病の生物学、肝臓からのグルコース放出、膵島機能の研究において重要です。さらにGLUT2は他のヘキソースも輸送し得るため、SLC2A2の攪乱はより広範な糖質利用や細胞のエネルギーバランスにも影響します。

Glucose Transporter Glut2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC2A2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC2A2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC2A2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Glucose Transporter Glut2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Glucose Transporter Glut2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC2A2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Glucose Transporter Glut2の機能に不可欠なSLC2A2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC2A2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Glucose Transporter Glut2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGlucose Transporter Glut2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC2A2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Glucose Transporter Glut2 HDRプラスミド（h）および Glucose Transporter Glut2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC2A2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC2A2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。