Plásmido Doble Nickase (h) GILZ: sc-401424-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GILZ consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GILZ (h) y el plásmido de doble nickasa GILZ (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TSC22D3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GILZ Anticuerpo (B-2): sc-515835
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GILZ | sc-401424-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GILZ | sc-401424-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TSC22D3 codifica la proteína “glucocorticoid-induced leucine zipper” (GILZ), un regulador transcripcional inducible que integra la señalización del receptor de glucocorticoides con programas inflamatorios y de respuesta al estrés. GILZ modula la expresión génica al interactuar con factores de transcripción y nodos de señalización clave, incluidos NF-κB y AP-1, influyendo así en la producción de citocinas, la activación de células inmunitarias y la apoptosis. En células humanas, TSC22D3 se ha vinculado con la regulación de las respuestas de las células T, la polarización de macrófagos y la señalización inflamatoria epitelial, situándolo en vías relevantes para la homeostasis inmunitaria y la remodelación tisular. La expresión desregulada de GILZ se ha asociado con estados inflamatorios alterados y cambios dependientes del contexto en la supervivencia y diferenciación celulares, que se estudian en modelos de biología autoinmune, metabólica y del cáncer.
GILZ El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TSC22D3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TSC22D3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TSC22D3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TSC22D3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.