GILZ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401424-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GILZO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GILZ (h) e o Plasmídeo Double Nickase GILZ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TSC22D3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GILZ Anticorpo (B-2): sc-515835
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GILZ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401424-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GILZ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401424-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TSC22D3 codifica o zipper de leucina induzido por glicocorticoides (GILZ), um regulador transcricional induzível que integra a sinalização do receptor de glicocorticoides com programas inflamatórios e de resposta ao estresse. O GILZ modula a expressão gênica ao interagir com fatores de transcrição e nós de sinalização-chave, incluindo NF-κB e AP-1, influenciando assim a produção de citocinas, a ativação de células imunes e a apoptose. Em células humanas, o TSC22D3 está ligado à regulação de respostas de células T, à polarização de macrófagos e à sinalização inflamatória epitelial, inserindo-se em vias relevantes para a homeostase imune e a remodelação tecidual. A expressão desregulada de GILZ tem sido associada a estados inflamatórios alterados e a mudanças dependentes do contexto na sobrevivência e diferenciação celular, estudadas em modelos de biologia autoimune, metabólica e do câncer.
GILZ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TSC22D3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TSC22D3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TSC22D3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TSC22D3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.