Plásmido Doble Nickase (h) GI24: sc-407831-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GI24 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GI24 (h) y el plásmido de doble nickasa GI24 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a VSIR. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GI24 | sc-407831-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GI24 | sc-407831-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
VSIR (receptor inmunorregulador V-set), también conocido como GI24/VISTA, codifica una molécula de punto de control inmunitario de la familia B7 que modula la activación de las células T y ayuda a mantener la tolerancia periférica. GI24 se expresa principalmente en los compartimentos hematopoyético y mieloide, donde influye en la función de las células presentadoras de antígeno y atenúa los programas de citocinas inflamatorias. A través de la regulación de la señalización coestimuladora, VSIR contribuye a la homeostasis inmunitaria en los tejidos y dentro del microambiente tumoral. La desregulación de la expresión o de la señalización de VSIR se ha asociado con cambios en la inmunidad antitumoral y con estados inflamatorios crónicos, lo que lo convierte en una diana útil para estudios mecanísticos de la inmunorregulación.
GI24 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus VSIR en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de VSIR. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de VSIR. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con VSIR alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.