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GHS-R1双切口酶质粒(h) | sc-401724-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GHS-R1双切口酶质粒(h2) | sc-401724-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GHSR 编码生长激素促分泌受体 1(GHS-R1),这是一种对胃饥饿素(ghrelin)有反应的 A 类 G 蛋白偶联受体(GPCR),参与调控食欲、能量稳态以及神经内分泌信号传导。配体结合后,GHS-R1 主要与 Gq/11 偶联,激活磷脂酶 C,提高细胞内 Ca2+ 水平,并调节 MAPK/ERK 信号;在某些细胞环境中还可偏向于通过 Gi/o 依赖性通路传递信号。该受体在下丘脑和垂体环路以及外周组织中均被广泛研究,用于整合代谢线索与生长激素释放及自主神经输出。GHSR 信号失调与肥胖相关表型、胰岛素敏感性改变以及奖赏与应激通路异常有关,因此在代谢与神经精神疾病研究模型中具有重要意义。
GHS-R1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GHSR 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GHSR内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GHSR的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GHSR基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。