Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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galectin-4 Double Nickase Plasmid (h): sc-404255-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das galectin-4 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- galectin-4 Double-Nickase-Plasmid (h) und galectin-4 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf LGALS4 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: galectin-4: sc-376398
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
galectin-4 Double Nickase Plasmid (h) | sc-404255-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
galectin-4 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-404255-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LGALS4 kodiert Galectin-4, ein β-Galaktosid-bindendes Lektin, das in intestinalen und epithelialen Geweben angereichert ist und an der Zelloberfläche sowie im extrazellulären Milieu wirkt, um glykanabhängige Interaktionen zu organisieren. Durch die Bindung spezifischer Glykoproteine und Glykolipide trägt Galectin-4 zur epithelialen Polarität, zur Stabilität von Adhärens- und Tight Junctions sowie zur Modulation der Zell‑Zell- und Zell‑Matrix-Adhäsion bei und beeinflusst dadurch Migration und die Homöostase der Barriere. Die Aktivität von Galectin-4 überschneidet sich mit Prozessen der mukosalen Immunität und inflammatorischen Signalgebung, indem sie Rezeptor-Clustering und endozytotisches Trafficking reguliert. Eine dysregulierte LGALS4-Expression wurde mit veränderter epithelialer Differenzierung und Krankheitskontexten des Kolorektums in Verbindung gebracht, was LGALS4 zu einem nützlichen Ziel macht, um glykanvermittelte Signalgebung und Barrierebiologie zu untersuchen.
galectin-4 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des LGALS4-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von LGALS4 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die LGALS4-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit LGALS4-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.