Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
GAD-67 Antibody (F-6): sc-28376. Western blot analysis of GAD-67 expression in non-transfected: sc-117752 (A) and human GAD-67 transfected: sc-175894 (B) 293T whole cell lysates.
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GAD-67双切口酶质粒(h): sc-400588-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GAD-67 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GAD-67双切酶质粒（h）和GAD-67双切酶质粒（h2）编码针对GAD1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GAD-67: sc-28376，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GAD-67双切口酶质粒(h) | sc-400588-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GAD-67双切口酶质粒(h2) | sc-400588-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 GAD1 基因编码谷氨酸脱羧酶 67（GAD-67），这是一种关键的胞质酶，催化谷氨酸转化为 γ-氨基丁酸（GABA），从而维持中枢神经系统的抑制性神经传递。GAD-67 支持基础水平的 GABA 生成，并通过调控细胞内神经递质储备池影响突触平衡、神经元兴奋性以及活动依赖性的可塑性。GAD1/GAD-67 的表达或调控发生改变与兴奋-抑制稳态失衡相关，并在神经发育与神经精神疾病研究中受到关注，包括精神分裂症、自闭症谱系障碍以及与癫痫相关的表型。作为 GABA 能神经元身份的标志物和功能决定因素，GAD-67 常用于研究抑制性回路的形成与成熟，以及应激反应相关的神经递质代谢。
GAD-67 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 GAD1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GAD1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏GAD1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了GAD1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。