Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rπ: sc-404623-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rπ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GABAA Rπ Double Nickase (h) et le plasmide GABAA Rπ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GABRP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rπ | sc-404623-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GABAA Rπ | sc-404623-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRP code la sous-unité π du récepteur humain GABA\(_A\), un canal chlorure ligand-dépendant qui assure la neurotransmission inhibitrice et module l’excitabilité membranaire via une signalisation synaptique et extrasynaptique rapide. L’incorporation de la sous-unité π peut modifier l’assemblage du récepteur, la cinétique d’ouverture/fermeture (gating) et la pharmacologie, influençant le flux de chlorure, les schémas de décharge neuronale et, plus largement, l’inhibition au niveau des circuits. La signalisation des récepteurs GABA\(_A\) s’articule avec des processus tels que la plasticité synaptique, le neurodéveloppement et la modulation des réseaux neuronaux en réponse au stress. Une signalisation GABAergique dysrégulée, notamment une composition altérée en sous-unités du récepteur, a été associée dans la littérature à des phénotypes neurologiques et neuropsychiatriques, ce qui appuie l’étude de GABRP dans des modèles cellulaires pertinents pour les maladies.
GABAA Rπ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GABRP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GABRP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GABRP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GABRP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.