Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO FXYD3 (h): sc-406431
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- FXYD3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique FXYD3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FXYD3 Antibody (A-8): sc-271808
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO FXYD3 (h) | sc-406431 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
FXYD3 (dysadhérine) est un membre de la famille FXYD, composée de petites protéines membranaires à passage unique qui modulent l’activité de la Na⁺/K⁺-ATPase, influençant ainsi l’homéostasie ionique, le potentiel membranaire et la physiologie du transport épithélial. En régulant la cinétique de la pompe et, en aval, des effets sur le volume cellulaire et la signalisation, FXYD3 peut affecter des processus tels que la prolifération, les réponses au stress et la dynamique de l’adhérence cellule–cellule. Une expression altérée de FXYD3 a été rapportée dans de multiples contextes cancéreux et fait souvent l’objet d’études portant sur ses liens avec la motilité et l’invasivité des cellules tumorales, ainsi que les changements d’état épithélial. En tant que régulateur associé à la surface cellulaire, FXYD3 est également pertinent pour l’étude des réseaux de protéines membranaires et des voies couplées à la Na⁺/K⁺-ATPase.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO FXYD3 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène FXYD3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du FXYD3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert FXYD3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine FXYD3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en FXYD3 pour l'étude de la signalisation de FXYD3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de FXYD3 essentiels à la fonction de FXYD3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de FXYD3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le FXYD3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le FXYD3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus FXYD3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le FXYD3 plasmide HDR (h) et le FXYD3 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie FXYD3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles FXYD3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.