FUCA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405221
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FUCA2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FUCA2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FUCA2 Anticorpo (B-11): sc-514038
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FUCA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405221 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FUCA2 codifica a alfa-L-fucosidase 2, uma glicosidase do tipo lisossomal secretada que hidrolisa resíduos terminais de fucose de glicoconjugados e glicolipídeos ligados por N e por O, contribuindo para o catabolismo e o remodelamento de glicanos. Ao modular o estado de fucosilação em proteínas da superfície celular e da matriz extracelular, a FUCA2 pode influenciar processos como a renovação de receptores, a adesão célula–célula e a sinalização de glicanos associada ao sistema imune. Alterações no metabolismo da fucose e na atividade de fucosidases têm sido associadas a mudanças nas respostas inflamatórias e em padrões de glicosilação ligados a tumores, tornando a FUCA2 um ponto útil para investigar fenótipos impulsionados pela glicômica. Estudos funcionais frequentemente se concentram em como a desfucosilação dependente de FUCA2 impacta o tráfego intracelular, a função lisossomal e vias de sinalização mediadas por glicoproteínas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FUCA2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FUCA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FUCA2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FUCA2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FUCA2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FUCA2 para a investigação da sinalização de FUCA2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FUCA2 críticos para a função FUCA2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FUCA2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FUCA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FUCA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FUCA2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FUCA2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FUCA2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FUCA2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FUCA2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.