FRAT2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406802

Descripción general

FRAT2 (Frequently rearranged in advanced T-cell lymphomas 2) codifica una proteína citoplasmática que modula la señalización canónica Wnt/β-catenina al interactuar con GSK3β e influir en la estabilidad de β-catenina y en los programas de transcripción posteriores. A través de esta vía, FRAT2 contribuye a la regulación de la proliferación y la diferenciación celular, así como de la organización del patrón durante el desarrollo, y puede interactuar con redes de señalización más amplias que controlan la progresión del ciclo celular y las decisiones de destino celular. La alteración de la actividad de la vía Wnt está implicada en múltiples contextos patológicos, incluida la transformación oncogénica y la remodelación tisular, lo que convierte a FRAT2 en un nodo útil para analizar la expresión génica dependiente de β-catenina. La evaluación funcional de FRAT2 respalda estudios mecanísticos sobre la interacción entre vías de señalización y la regulación específica del contexto en sistemas celulares humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FRAT2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FRAT2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FRAT2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FRAT2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FRAT2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FRAT2 para la investigación de la señalización de FRAT2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FRAT2 críticos para la función de FRAT2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FRAT2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FRAT2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FRAT2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FRAT2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FRAT2 (h) y el plásmido HDR FRAT2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FRAT2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FRAT2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.