FOXM1 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-416676-ACT

FOXM1（forkhead box M1）は増殖に関連する転写因子であり、DNA複製、紡錘体形成、染色体分配を制御する経路を含め、G1/S移行および有糸分裂への進入に必要な遺伝子を調節することで細胞周期の進行を統括する。CDK–サイクリンシグナルやDNA損傷応答プログラムなどの主要な制御ネットワークとも連携し、ゲノムの完全性を保ちながら細胞分裂を進めるバランスを調整する。FOXM1の異常発現はがん関連の転写シグネチャーでしばしば認められ、浸潤性増殖、ゲノム不安定性、細胞ストレス応答の変化と関連することから、腫瘍生物学および細胞周期制御を研究するうえで広く用いられる重要な因子となっている。さらにFOXM1は、上皮―間葉系の性質や酸化・複製ストレスに対する転写応答に影響を与えることで、組織リモデリングに関わるプログラムにも寄与する。

FOXM1 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性FOXM1の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

FOXM1 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における FOXM1 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はFOXM1転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性FOXM1の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のFOXM1遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるFOXM1依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびFOXM1発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるFOXM1経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。