FOXF1 Double Nickase Plasmid (h): sc-403521-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das FOXF1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- FOXF1 Double-Nickase-Plasmid (h) und FOXF1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf FOXF1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
FOXF1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403521-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FOXF1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403521-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXF1 (Forkhead box F1) kodiert einen Transkriptionsfaktor der Forkhead-Familie, der die mesenchymale Differenzierung, die Gefäßentwicklung sowie die epithelial–mesenchymale Signalübertragung während der Organogenese reguliert. In menschlichen Zellen beeinflusst FOXF1 Transkriptionsprogramme, die den Umbau der extrazellulären Matrix, die Zellmigration und die Expression angiogener Gene steuern, und ist in entwicklungsbiologische Signalnetzwerke wie die Hedgehog-, WNT- und TGF-β/SMAD-Signalwege eingebunden. Veränderungen der FOXF1-Dosierung oder Störungen seiner Regulation wurden mit angeborenen Lungen- und Gefäßfehlbildungen sowie mit fehlregulierten stromalen Programmen in der Krebsbiologie in Verbindung gebracht. Als Regulator von Zelllinie und Mikroumgebung wird FOXF1 häufig in Modellen des pulmonalen Mesenchyms, von endothelial–stromalen Interaktionen und der entwicklungsbezogenen transkriptionellen Kontrolle untersucht.
FOXF1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des FOXF1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von FOXF1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die FOXF1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit FOXF1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.