FOXF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403521

Descripción general

FOXF1 (forkhead box F1) codifica un factor de transcripción de tipo forkhead que controla la identidad de las células mesenquimales y la señalización epitelio–mesénquima durante el desarrollo, con funciones destacadas en la morfogénesis del pulmón y de la vasculatura pulmonar. FOXF1 regula programas génicos vinculados a la organización de la matriz extracelular, la migración celular y la diferenciación de músculo liso/pericitos, integrándose con vías del desarrollo como Hedgehog, WNT/β-catenina y la señalización de TGF-β. Alteraciones en la dosis de FOXF1 o disrupciones regulatorias se han asociado con anomalías congénitas pulmonares y vasculares, y se han investigado en contextos de remodelación estromal aberrante e interacciones entre tumores y el microambiente. Como proteína nuclear de unión al ADN, FOXF1 ofrece un punto de entrada manejable para analizar redes transcripcionales que coordinan el patrón tisular y la estabilidad vascular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FOXF1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FOXF1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FOXF1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FOXF1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FOXF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FOXF1 para la investigación de la señalización de FOXF1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FOXF1 críticos para la función de FOXF1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FOXF1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FOXF1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FOXF1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FOXF1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FOXF1 (h) y el plásmido HDR FOXF1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FOXF1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FOXF1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.