Plásmido Doble Nickase (h) FN3KRP: sc-413205-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FN3KRP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FN3KRP (h) y el plásmido de doble nickasa FN3KRP (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FN3KRP. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FN3KRP Anticuerpo (G-1): sc-376717
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FN3KRP | sc-413205-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FN3KRP | sc-413205-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FN3KRP (proteína relacionada con la fructosamina-3-quinasa) es un miembro de la familia FN3K implicado en la desglicación de proteínas y en las defensas celulares frente a la glicación no enzimática. Al modular el recambio de aductos de fructosamina/Amadori en las proteínas, FN3KRP se asocia con la proteostasis, el equilibrio redox y las respuestas al estrés metabólico relevantes para la homeostasis de la glucosa. La actividad alterada en las vías de glicación–desglicación puede influir en la acumulación de productos finales de glicación avanzada y en la señalización posterior asociada al estrés oxidativo y la inflamación. Como resultado, FN3KRP se estudia en el contexto de la disrregulación metabólica y de fenotipos celulares asociados a la glicación en células humanas.
FN3KRP El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FN3KRP en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FN3KRP. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FN3KRP. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FN3KRP alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.