FBXO3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425412
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FBXO3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FBXO3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FBXO3 Anticorpo (C-7): sc-514625
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FBXO3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-425412 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Fbxo3 codifica a proteína F-box FBXO3 em camundongos, um componente de reconhecimento de substratos dos complexos de ligase de ubiquitina E3 do tipo SCF (SKP1–CUL1–RBX1), que ajudam a controlar a proteostase por meio do turnover proteico dependente de ubiquitina. Ao direcionar a ubiquitinação seletiva, a FBXO3 influencia a dinâmica da sinalização celular, programas de ciclo celular e resposta ao estresse, e a estabilidade de reguladores de vias. Alterações de atividade em redes SCF–F-box têm sido associadas à inflamação desregulada e a uma sinalização imune mais ampla, bem como a mudanças na homeostase celular relevantes para a biologia de doenças. Essas características tornam o Fbxo3 um nó útil para estudar como a via ubiquitina–proteassoma controla a sinalização e o fenótipo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FBXO3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Fbxo3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Fbxo3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Fbxo3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FBXO3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Fbxo3 para a investigação da sinalização de FBXO3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Fbxo3 críticos para a função FBXO3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Fbxo3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FBXO3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo FBXO3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Fbxo3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FBXO3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR FBXO3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Fbxo3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Fbxo3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.