Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO FANCF (h): sc-406909
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- FANCF Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique FANCF, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FANCF Antibody (D-2): sc-271952
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO FANCF (h) | sc-406909 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
FANCF code un composant essentiel de la voie de réparation de l’ADN de l’anémie de Fanconi (FA), qui contribue à l’assemblage et à la stabilisation du complexe central FA responsable de la monoubiquitination de FANCD2 et de FANCI. Cette modification coordonne la réparation des pontages interbrins de l’ADN et favorise la protection des fourches de réplication via des interactions avec la recombinaison homologue et la signalisation des points de contrôle. La fonction de FANCF soutient la stabilité du génome durant la phase S, et la perte ou la dérégulation de l’activité de la voie FA est liée à l’instabilité chromosomique et à des réponses altérées au stress de réplication. Les anomalies génétiques des gènes FA, dont FANCF, sont associées à la biologie de l’anémie de Fanconi et sont largement étudiées dans le cadre des mécanismes de tolérance aux dommages de l’ADN.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO FANCF (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène FANCF dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du FANCF, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert FANCF à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine FANCF.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en FANCF pour l'étude de la signalisation de FANCF, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de FANCF essentiels à la fonction de FANCF
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de FANCF pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le FANCF plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le FANCF plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus FANCF. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le FANCF plasmide HDR (h) et le FANCF (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie FANCF pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles FANCF définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.