Plasmide Double Nickase (h) FANCB: sc-417439-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FANCB correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FANCB Double Nickase (h) et le plasmide FANCB Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FANCB. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FANCB | sc-417439-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FANCB | sc-417439-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FANCB code un composant central du complexe nucléaire de l’anémie de Fanconi (FA), qui permet la monoubiquitination de FANCD2 et de FANCI, une étape clé de la voie FA de réparation des pontages interbrins de l’ADN. En coordination avec la recombinaison homologue et les facteurs de protection des fourches de réplication, FANCB contribue au maintien de la stabilité du génome pendant la phase S et en situation de stress génotoxique. Des altérations avec perte de fonction de FANCB sont associées à l’anémie de Fanconi et favorisent des phénotypes d’instabilité chromosomique pertinents pour la biologie du cancer. FANCB est donc couramment étudié dans les travaux sur la signalisation de la réponse aux dommages de l’ADN, le stress de réplication et les analyses d’épistasie des voies.
FANCB Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FANCB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FANCB. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FANCB. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FANCB.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.