FAIM Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423872

Descripción general

Faim codifica la molécula inhibidora de la apoptosis mediada por Fas (FAIM), un factor citoprotector que atenúa la apoptosis desencadenada por receptores de muerte y modula la señalización de supervivencia celular en respuesta a señales de la familia Fas/TNFR. En células de ratón, FAIM se ha vinculado con la regulación de la activación de caspasas, las respuestas al estrés y vías de supervivencia como NF-κB y PI3K/AKT, influyendo en los resultados durante la activación inmunitaria y la homeostasis tisular. La alteración de la actividad de FAIM se ha asociado con una supervivencia linfocitaria desregulada, una mayor sensibilidad al estrés neurodegenerativo y fenotipos inflamatorios, lo que la hace relevante para estudiar el control de la apoptosis y las decisiones de destino celular. El análisis funcional de Faim respalda trabajos mecanísticos en inmunología, neurobiología y en las vías que gobiernan la resistencia a estímulos apoptóticos extrínsecos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FAIM (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Faim en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Faim junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Faim tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FAIM.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Faim para la investigación de la señalización de FAIM, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Faim críticos para la función de FAIM
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Faim para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FAIM CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido FAIM CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Faim. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FAIM (m) y el plásmido HDR FAIM (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Faim para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Faim definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.