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Estrogen Receptor alpha慢病毒激活颗粒(m) | sc-418925-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
Estrogen Receptor alpha慢病毒激活颗粒(m2) | sc-418925-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Esr1 编码雌激素受体α(ERα),这是一种配体激活的核受体,可作为转录因子,将雌激素信号与细胞身份、增殖和分化等广泛生物学程序连接起来。激活后,ERα 结合雌激素反应元件,并与辅因子协同调控染色质可及性与转录;同时也可通过 MAPK 和 PI3K/AKT 通路介导快速的非基因组信号传导。ERα 的活性与细胞因子及生长因子信号发生交叉,从而影响生殖与非生殖器官中的代谢、免疫细胞极化以及组织重塑。ERα 信号失调在激素反应性生物学研究中受到广泛关注,也与内分泌干扰、炎症相关重塑以及致癌性转录网络的机制密切相关。
Estrogen Receptor alpha 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Esr1 表达。
Estrogen Receptor alpha 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Esr1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Estrogen Receptor alpha表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Esr1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。