Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ERGIC-53 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401602-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ERGIC-53O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ERGIC-53 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ERGIC-53 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LMAN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ERGIC-53 Anticorpo (F-3): sc-398777
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ERGIC-53 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401602-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ERGIC-53 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401602-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LMAN1 codifica a ERGIC-53, uma lectina específica para manose que cicla entre o retículo endoplasmático (RE), o compartimento intermediário RE–Golgi (ERGIC) e o cis-Golgi, promovendo o tráfego de cargas selecionadas de glicoproteínas. Como parte da via secretória inicial, a ERGIC-53 coopera com o cofator MCFD2 para apoiar a saída do RE e o controle de qualidade de proteínas corretamente dobradas, ligando a captura de carga mediada por lectina ao transporte dependente de COPII. A interrupção da triagem dependente de LMAN1 pode perturbar a secreção proteica e a homeostase do RE, tornando-a relevante para estudos de proteostase, tráfego dependente de glicosilação e respostas ao estresse da via secretória. Variantes humanas de perda de função em LMAN1 estão associadas à deficiência combinada dos fatores de coagulação V e VIII, fornecendo uma base genética para investigar mecanismos de secreção específicos de carga, sem implicar uso clínico.
ERGIC-53 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LMAN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LMAN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LMAN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LMAN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.