非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
EphA4 抗体 (D-4): sc-365503. MOLT-4 (A), Ramos (B), Hep G2 (C), SK-BR-3 (D), HL-60 (E) 和 K-562 (F) 全细胞裂解液中 EphA4 表达的近红外 western 印迹分析. 用 UltraCruz® 阻断试剂: sc-516214 阻断. 所用检测试剂: m-IgGκ BP-CFL 680: sc-516180.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
EphA4双切口酶质粒(h): sc-400729-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EphA4 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- EphA4双切酶质粒（h）和EphA4双切酶质粒（h2）编码针对EPHA4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EphA4: sc-365503，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EphA4双切口酶质粒(h) | sc-400729-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EphA4双切口酶质粒(h2) | sc-400729-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPHA4 编码 Eph/ephrin 家族的受体酪氨酸激酶 EphA4，通过接触依赖性的信号传导发挥作用，对轴突导向、突触可塑性以及组织边界形成至关重要。与 ephrin 配体结合后，EphA4 可触发双向信号传递，并通过涉及 Rho 家族 GTP 酶、MAPK 级联反应以及 PI3K 相关信号通路的机制，调控细胞骨架重塑、细胞黏附与迁移。在人体生物学中，EphA4 信号的异常改变与神经元连接失调及异常的细胞运动程序相关，这些现象与神经发育和神经退行性疾病背景有关；在癌症模型中也与侵袭相关表型有关。上述特征使 EPHA4 成为研究受体酪氨酸激酶串话、配体依赖性信号动态以及细胞—细胞通讯机制的一个有用节点。
EphA4 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 EPHA4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EPHA4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏EPHA4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了EPHA4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。