Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400647-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EPAS-1/HIF-2 alphaO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EPAS-1/HIF-2 alpha (h) e o Plasmídeo Double Nickase EPAS-1/HIF-2 alpha (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EPAS1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EPAS-1/HIF-2 alpha Anticorpo (190b): sc-13596
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400647-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400647-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPAS1 codifica o EPAS-1/HIF-2 alfa, um fator de transcrição bHLH-PAS sensível ao oxigênio que forma um heterodímero com o ARNT (HIF-1β) para coordenar a expressão gênica adaptativa à hipóxia. Em condições de baixo oxigênio, o EPAS-1/HIF-2 alfa escapa da degradação mediada por prolil-hidroxilase–VHL, acumula-se no núcleo e ativa programas que controlam a angiogênese, a eritropoiese, o metabolismo do ferro e a reprogramação metabólica. A sinalização de EPAS1 interage com as vias PI3K–AKT–mTOR e MAPK e contribui para decisões de destino celular em células endoteliais e em outros tecidos responsivos ao oxigênio. A atividade desregulada de EPAS1 e a sinalização hipóxica alterada estão implicadas na biologia tumoral e no remodelamento vascular, e variantes de EPAS1 têm sido associadas a distúrbios de detecção de oxigênio.
EPAS-1/HIF-2 alpha O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EPAS1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EPAS1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EPAS1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EPAS1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.