Plasmide Double Nickase (h) EMP-1: sc-403122-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) EMP-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide EMP-1 Double Nickase (h) et le plasmide EMP-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EMP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) EMP-1 | sc-403122-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) EMP-1 | sc-403122-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La protéine de membrane épithéliale 1 (EMP1) est une glycoprotéine membranaire tétraspan impliquée dans les interactions cellule–cellule, l’organisation membranaire et la régulation des programmes de différenciation épithéliale. Dans les cellules humaines, EMP-1 a été associée à la modulation de l’adhérence et des phénotypes migratoires, et s’inscrit à l’interface de réseaux de signalisation qui façonnent la prolifération et les réponses au stress, notamment des voies liées à MAPK/ERK et PI3K/AKT. Des altérations de l’expression d’EMP1 ont été rapportées dans de nombreux cancers ainsi que dans des contextes inflammatoires ou fibrosants, ce qui en fait un marqueur utile pour étudier la plasticité des cellules tumorales et le remodelage tissulaire. L’étude expérimentale d’EMP1 aide à préciser comment la composition des microdomaines membranaires influence la signalisation en aval et les états transcriptionnels.
EMP-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EMP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EMP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EMP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EMP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.