Plasmide Double Nickase (h) ELOVL2: sc-404998-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ELOVL2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ELOVL2 Double Nickase (h) et le plasmide ELOVL2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ELOVL2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ELOVL2 | sc-404998-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ELOVL2 | sc-404998-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELOVL2 (élongation des acides gras à très longue chaîne, protéine 2) est une élongase d’acides gras localisée au réticulum endoplasmique, qui catalyse des étapes d’élongation limitantes conduisant à la production d’acides gras polyinsaturés à longue chaîne, notamment des précurseurs de la biosynthèse du DHA. En modulant la composition en phospholipides des membranes et les médiateurs de signalisation dérivés des lipides, ELOVL2 influence des processus cellulaires tels que la fluidité membranaire, les réponses au stress oxydatif et l’homéostasie métabolique. Des modifications de l’activité et de la régulation d’ELOVL2 ont été associées à des changements liés à l’âge dans le métabolisme lipidique et l’état épigénétique, et ont été étudiées dans des contextes incluant la biologie rétinienne, la neurobiologie et les mécanismes des maladies métaboliques. En tant que nœud conservé des voies d’élongation lipidique, ELOVL2 constitue une cible accessible pour analyser comment la disponibilité en AGPI (PUFA) affecte la fonction des organites et les réseaux de signalisation cellulaire.
ELOVL2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ELOVL2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ELOVL2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ELOVL2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ELOVL2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.