非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
EAAT2 抗体 (E-1): sc-365634. HT-1080 (A) 和 SH-SY5Y (B) 全细胞裂解液以及大鼠脑 (C), 小鼠脑 (D) 和人脑 (E) 组织提取物中 EAAT2 表达的近红外 western 印迹分析. 用 UltraCruz® 阻断试剂: sc-516214 阻断. 所用检测试剂: m-IgGκ BP-CFL 680: sc-516180.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
EAAT2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-422984
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EAAT2 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在EAAT2基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EAAT2: sc-365634，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EAAT2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-422984 | 20 µg | $397.00 |
概述
Slc1a2 编码兴奋性氨基酸转运体 2（EAAT2），这是一种高容量、Na⁺ 依赖性的谷氨酸转运体，主要在星形胶质细胞中表达，负责清除突触间隙中的谷氨酸，以维持兴奋性神经传递并防止兴奋性毒性应激。EAAT2 通过将谷氨酸摄取与离子梯度相耦联，并通过谷氨酸–谷氨酰胺循环支持星形胶质细胞与神经元之间的代谢耦联，从而塑造谷氨酸能信号传导。通过调控细胞外谷氨酸稳态，Slc1a2 影响突触可塑性、神经元存活以及网络兴奋性。EAAT2 功能或表达的改变与神经退行性变、癫痫和神经炎症等相关机制有关，因此 Slc1a2 常被作为中枢神经系统通路研究中的重要靶点。
EAAT2 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Slc1a2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Slc1a2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Slc1a2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使EAAT2蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Slc1a2缺失的细胞模型，用于EAAT2信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 EAAT2 功能至关重要的 Slc1a2 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Slc1a2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 EAAT2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 EAAT2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Slc1a2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 EAAT2 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 EAAT2 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Slc1a2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Slc1a2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。