非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
EAAT1 抗体 (A-3): sc-515839. 人小脑组织提取物中 EAAT1 表达的近红外 Western 印迹分析. 所用检测试剂: m-IgGκ BP-CFL 790: sc-516181.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
EAAT1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-400917
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EAAT1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在EAAT1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EAAT1: sc-515839，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EAAT1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-400917 | 20 µg | $397.00 |
概述
SLC1A3 编码兴奋性氨基酸转运体 1（EAAT1）。EAAT1 是一种高亲和力、钠依赖性的谷氨酸/天冬氨酸转运体，在星形胶质细胞中富集，有助于清除细胞外谷氨酸。EAAT1 通过将谷氨酸摄取与离子梯度耦联，帮助维持突触传递，调控神经元–胶质细胞的代谢耦联，并限制兴奋毒性信号；同时，谷氨酸作为谷胱甘肽合成底物的可用性也使其参与维持氧化还原平衡。EAAT1 的活性与谷氨酸能神经传递、星形胶质细胞的稳态调控程序，以及控制细胞外离子缓冲和神经递质再循环的通路相互整合。SLC1A3 功能或表达的异常与多种神经发育和神经退行性表型有关，包括发作性共济失调以及对兴奋毒性损伤的易感性，因此在研究中枢神经系统回路稳定性与胶质生物学时具有重要意义。
EAAT1 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中SLC1A3基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对SLC1A3基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏SLC1A3开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使EAAT1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建SLC1A3缺失的细胞模型，用于EAAT1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 EAAT1 功能至关重要的 SLC1A3 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 SLC1A3 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 EAAT1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 EAAT1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 SLC1A3 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 EAAT1 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 EAAT1 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由SLC1A3同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定SLC1A3靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。