Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO dsg3 (h): sc-401809
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- dsg3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique dsg3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: dsg3 Antibody (5H10): sc-23912
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO dsg3 (h) | sc-401809 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
DSG3 code la desmogléine‑3, une cadhérine desmosomale qui assure une adhésion cellule‑cellule dépendante du calcium dans les épithéliums stratifiés et contribue au maintien de l’intégrité tissulaire sous contrainte mécanique. DSG3 interagit avec la desmoplakine et la plakoglobine pour ancrer les filaments intermédiaires et coordonner l’organisation des jonctions, reliant l’assemblage des desmosomes au remodelage du cytosquelette et aux programmes de différenciation épithéliale. Par son rôle dans la signalisation dépendante de l’adhésion, DSG3 influence des processus tels que la formation de la barrière, la polarité cellulaire et la migration collective. Une expression altérée de DSG3 ou le ciblage de la desmogléine‑3 par des auto‑anticorps ont été associés à une fragilité épithéliale et à des phénotypes bulleux, et la dérégulation des composants desmosomaux est fréquemment étudiée dans le cadre de la biologie des tumeurs épithéliales.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO dsg3 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène DSG3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du DSG3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert DSG3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine dsg3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en DSG3 pour l'étude de la signalisation de dsg3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de DSG3 essentiels à la fonction de dsg3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de DSG3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le dsg3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le dsg3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus DSG3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le dsg3 plasmide HDR (h) et le dsg3 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie DSG3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles DSG3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.