Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DNase I Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402467-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DNase IO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DNase I (h) e o Plasmídeo Double Nickase DNase I (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DNASE1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DNase I Anticorpo (B-4): sc-376207
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DNase I Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402467-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DNase I Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402467-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A DNASE1 humana codifica a DNase I, uma endonuclease secretada que cliva DNA extracelular e DNA associado à cromatina, contribuindo para a depuração de ácidos nucleicos e para a regulação da sinalização inflamatória desencadeada por DNA próprio. A atividade da DNase I influencia processos ligados à fragmentação de DNA associada à apoptose, à remoção/reciclagem de armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs) e à prevenção de ativação aberrante da imunidade inata por meio de vias de detecção de DNA. Alterações na expressão ou na atividade de DNASE1 têm sido associadas à depuração prejudicada de DNA circulante e à desregulação imune, contextos frequentemente investigados em modelos de autoimunidade e de lesão tecidual. Em biologia do câncer e do estroma, a renovação/turnover de DNA mediada por DNase I também é estudada por seus efeitos no microambiente tumoral e na sinalização por ácidos nucleicos extracelulares.
DNase I O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DNASE1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DNASE1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DNASE1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DNASE1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.