Plasmide CRISPR/Cas9 KO Dmp1 (h): sc-402941
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Dmp1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Dmp1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Dmp1 Antibody (DMTF5I250): sc-81249
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Dmp1 (h) | sc-402941 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène humain DMTF1 code Dmp1, un facteur de transcription de type Myb qui régule la progression du cycle cellulaire en modulant l’axe ARF–MDM2–p53 et en s’articulant avec le contrôle RB/E2F dépendant des programmes transcriptionnels de la transition G1/S. Dmp1 se fixe à des éléments promoteurs de gènes impliqués dans la prolifération et les réponses aux points de contrôle, influençant ainsi la sénescence cellulaire, la signalisation du stress et le contrôle de la croissance induit par les oncogènes. Des altérations de l’activité ou du dosage de DMTF1 ont été associées à une prolifération dérégulée et à un déséquilibre des réseaux suppresseurs de tumeurs, ce qui en fait un nœud utile pour étudier le contrôle transcriptionnel des décisions de destinée cellulaire dans des contextes pertinents pour le cancer.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Dmp1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène DMTF1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du DMTF1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert DMTF1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Dmp1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en DMTF1 pour l'étude de la signalisation de Dmp1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de DMTF1 essentiels à la fonction de Dmp1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de DMTF1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Dmp1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Dmp1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus DMTF1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Dmp1 plasmide HDR (h) et le Dmp1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie DMTF1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles DMTF1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.