Dmp1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402941
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Dmp1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Dmp1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Dmp1 Anticuerpo (DMTF5I250): sc-81249
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Dmp1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402941 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen humano DMTF1 codifica Dmp1, un factor de transcripción tipo Myb que regula la progresión del ciclo celular al modular el eje ARF–MDM2–p53 e interactuar con el control dependiente de RB/E2F de los programas transcripcionales de G1/S. Dmp1 se une a elementos promotores en genes que gobiernan la proliferación y las respuestas de control (checkpoints), influyendo así en la senescencia celular, la señalización de estrés y el control del crecimiento inducido por oncogenes. La alteración de la actividad o la dosis de DMTF1 se ha vinculado con una proliferación desregulada y con desequilibrios en la red de supresores tumorales, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar el control transcripcional de las decisiones de destino celular en contextos relevantes para el cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Dmp1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DMTF1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DMTF1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DMTF1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Dmp1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DMTF1 para la investigación de la señalización de Dmp1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DMTF1 críticos para la función de Dmp1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DMTF1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Dmp1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Dmp1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DMTF1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Dmp1 (h) y el plásmido HDR Dmp1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DMTF1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DMTF1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.