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Decorin双切口酶质粒(h) | sc-400786-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Decorin双切口酶质粒(h2) | sc-400786-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DCN 编码 decorin(装饰蛋白),这是一种分泌型的小亮氨酸丰富蛋白聚糖(SLRP),可通过与胶原结合并调控纤维形成过程来组织细胞外基质的结构。Decorin 还参与调节包括 TGF-β 在内的生长因子信号通路,影响 SMAD 依赖的转录、细胞黏附以及迁移程序,从而塑造组织重塑。通过这些细胞外相互作用,DCN 会影响基质微环境中的成纤维细胞活化、血管生成的平衡以及炎症相关的串扰。DCN 表达水平或 decorin 蛋白聚糖组成的改变与纤维化、伤口修复受损以及肿瘤—基质相互作用有关,因此是研究基质信号机制的有用靶点。
Decorin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DCN 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DCN内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DCN的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DCN基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。