DARPP-32慢病毒激活颗粒(h2): sc-400430-LAC-2
- 针对种属：human
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- DARPP-32 慢病毒激活颗粒（h2）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- DARPP-32慢病毒激活颗粒(h2)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 DARPP-32 慢病毒激活质粒 (h2) 和 DARPP-32 慢病毒激活质粒 (h22) 编码的 gRNA 靶向 PPP1R1B 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因激活效率可以用抗体：DARPP-32 Antibody (H-3): sc-271111，通过WB、IF或IHC分析
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DARPP-32慢病毒激活颗粒(h2) | sc-400430-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
人类PPP1R1B基因编码DARPP-32（32 kDa多巴胺与cAMP调控的磷蛋白），它是中型棘状神经元中的关键信号整合枢纽，将多巴胺能与谷氨酸能输入连接到对蛋白磷酸酶1（PP1）的调控；在PKA依赖性磷酸化后，DARPP-32可抑制PP1，从而调节下游磷酸化网络，控制cAMP/PKA及多巴胺受体通路中的突触可塑性、神经元兴奋性和转录程序，而其不同的替代性磷酸化状态还可与钙调神经磷酸酶（calcineurin）及其他激酶耦联；PPP1R1B/DARPP-32信号异常与神经精神和神经退行性表型相关，并在某些肿瘤背景下与致癌信号失调有关，反映其在依赖磷酸化的细胞状态调控中的广泛作用；对PPP1R1B进行基因编辑可支持多巴胺介导信号转导、磷酸酶/激酶平衡机制以及在神经元模型和疾病相关细胞系统中的通路解析研究。
DARPP-32 慢病毒激活颗粒（h2）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PPP1R1B 表达。
DARPP-32 慢病毒激活颗粒（h2）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在PPP1R1B转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性DARPP-32表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 PPP1R1B 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。