Plásmido Doble Nickase (h) Cytokeratin 6B: sc-401651-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Cytokeratin 6B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Cytokeratin 6B (h) y el plásmido de doble nickasa Cytokeratin 6B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a KRT6B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Cytokeratin 6B | sc-401651-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Cytokeratin 6B | sc-401651-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KRT6B codifica la citoqueratina 6B, una proteína de filamentos intermedios de tipo II que forma heterodímeros con queratinas de tipo I para constituir la red del citoesqueleto de los epitelios estratificados. La citoqueratina 6B contribuye a la estabilidad mecánica, la diferenciación epitelial y la remodelación inducida por estrés, coordinándose con complejos de adhesión desmosomales y hemidesmosomales para mantener la integridad tisular. Su expresión está estrechamente vinculada a los programas de reparación de heridas y a los estados de activación de los queratinocitos, en intersección con vías que regulan la organización del citoesqueleto, la migración celular y la función de barrera. La expresión desregulada de la queratina 6B o las alteraciones de la red de queratinas se asocian con la hiperproliferación epitelial y fenotipos de genodermatosis, lo que respalda su uso como marcador y como nodo funcional en la biología cutánea y la investigación sobre queratinización.
Cytokeratin 6B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus KRT6B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de KRT6B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de KRT6B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con KRT6B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.