Plasmide Double Nickase (h) CysLT1 Receptor: sc-416516-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CysLT1 Receptor correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CysLT1 Receptor Double Nickase (h) et le plasmide CysLT1 Receptor Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CYSLTR1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CysLT1 Receptor | sc-416516-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CysLT1 Receptor | sc-416516-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYSLTR1 code le récepteur humain des leucotriènes cystéinylés de type 1 (récepteur CysLT1), un GPCR de classe A qui se lie à LTC4, LTD4 et LTE4 afin d’initier la signalisation Gαq/PLCβ, la mobilisation intracellulaire de Ca2+ et l’activation en aval des MAPK. L’engagement du récepteur favorise l’activation des cellules inflammatoires, la contraction du muscle lisse et la modulation de la perméabilité vasculaire, reliant ainsi CYSLTR1 aux réponses immunitaires innées et adaptatives dépendantes des leucotriènes. L’activité de CYSLTR1 s’intègre au métabolisme de l’acide arachidonique et aux réseaux de signalisation des eicosanoïdes, et peut influencer la production de cytokines ainsi que la chimiotaxie. Une signalisation dysrégulée du récepteur CysLT1 a été associée à des phénotypes inflammatoires chroniques, à l’hyperréactivité des voies aériennes et à l’inflammation associée aux tumeurs, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques des voies des leucotriènes.
CysLT1 Receptor Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CYSLTR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CYSLTR1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CYSLTR1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CYSLTR1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.