CysLT1 Receptor Double Nickase Plasmid (h): sc-416516-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CysLT1 Receptor Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CysLT1 Receptor Double-Nickase-Plasmid (h) und CysLT1 Receptor Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CYSLTR1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CysLT1 Receptor Double Nickase Plasmid (h) | sc-416516-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CysLT1 Receptor Double Nickase Plasmid (h2) | sc-416516-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYSLTR1 kodiert den menschlichen Cysteinyl‑Leukotrien‑Rezeptor 1 (CysLT1‑Rezeptor), einen GPCR der Klasse A, der LTC4, LTD4 und LTE4 bindet und dadurch die Gαq/PLCβ‑Signalübertragung, die Mobilisierung von intrazellulärem Ca2+ sowie eine nachgeschaltete MAPK‑Aktivierung auslöst. Die Rezeptoraktivierung fördert die Aktivierung entzündlicher Zellen, die Kontraktion glatter Muskulatur und die Modulation der Gefäßpermeabilität und verknüpft CYSLTR1 damit mit leukotriengetriebenen angeborenen und adaptiven Immunantworten. Die CYSLTR1‑Aktivität ist in den Arachidonsäurestoffwechsel und Eicosanoid‑Signalnetzwerke eingebettet und kann die Zytokinproduktion sowie die Chemotaxis beeinflussen. Eine fehlregulierte CysLT1‑Rezeptor‑Signalgebung wurde mit chronisch‑entzündlichen Phänotypen, Hyperreagibilität der Atemwege und tumorassoziierter Entzündung in Verbindung gebracht, was ihn zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien von Leukotrien‑Signalwegen macht.
CysLT1 Receptor Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CYSLTR1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CYSLTR1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CYSLTR1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CYSLTR1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.