Plasmide Double Nickase (h) CYP4F3: sc-410873-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CYP4F3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CYP4F3 Double Nickase (h) et le plasmide CYP4F3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CYP4F3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CYP4F3 | sc-410873-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CYP4F3 | sc-410873-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP4F3 code une ω-hydroxylase du cytochrome P450 qui catalyse l’inactivation oxydative de médiateurs lipidiques, notamment le leucotriène B4 et des eicosanoïdes apparentés. En contrôlant ces substrats, CYP4F3 contribue à la régulation de la signalisation inflammatoire, de la chimiotaxie des neutrophiles et des voies de résolution liées au métabolisme de l’acide arachidonique. L’enzyme est également impliquée dans l’oxydation des acides gras et l’homéostasie rédox au sein du système P450 du réticulum endoplasmique. Des altérations de l’activité ou de l’expression de CYP4F3 ont été associées à une dérégulation du renouvellement des eicosanoïdes observée dans des états inflammatoires, ainsi qu’à des variations de phénotypes de métabolisme des médicaments et des xénobiotiques, pertinentes pour la recherche en pharmacologie.
CYP4F3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CYP4F3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CYP4F3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CYP4F3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CYP4F3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.