Plasmide Double Nickase (h) CYP2F1: sc-404064-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CYP2F1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CYP2F1 Double Nickase (h) et le plasmide CYP2F1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CYP2F1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CYP2F1 Antibody (E-10): sc-377499
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CYP2F1 | sc-404064-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CYP2F1 | sc-404064-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP2F1 code une monooxygénase du cytochrome P450 qui catalyse le métabolisme oxydatif de substrats endogènes et xénobiotiques, contribuant aux réactions de détoxification cellulaire et de bioactivation. En tant que composant du système rédox des P450, CYP2F1 couple le transfert d’électrons depuis le NADPH via la réductase du cytochrome P450 afin de soutenir des réactions d’oxygénation susceptibles d’influencer le stress oxydant, la formation d’électrophiles et les réponses de signalisation en aval. L’activité de CYP2F1 est pertinente pour la biologie des voies aériennes et du poumon, où l’activation métabolique de certains composés inhalés peut moduler les réponses de l’épithélium aux lésions et les processus inflammatoires. Une régulation altérée de CYP2F1 a été étudiée dans le cadre de la variabilité interindividuelle du métabolisme des xénobiotiques et de la susceptibilité aux lésions tissulaires induites par des substances chimiques.
CYP2F1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CYP2F1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CYP2F1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CYP2F1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CYP2F1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.