Plasmide Double Nickase (h) CYP2A6: sc-403448-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CYP2A6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CYP2A6 Double Nickase (h) et le plasmide CYP2A6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CYP2A6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CYP2A6 | sc-403448-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CYP2A6 | sc-403448-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **CYP2A6** code une monooxygénase microsomale du cytochrome P450 qui catalyse le métabolisme oxydatif de divers xénobiotiques et substrats endogènes, contribuant à la capacité de détoxification hépatique et aux variations interindividuelles de la clairance des médicaments. **CYP2A6** est l’un des principaux enzymes responsables de la C‑oxydation de la nicotine en cotinine et participe également à l’activation/inactivation métabolique de multiples substances chimiques environnementales via un transfert d’électrons dépendant de la NADPH–cytochrome P450 réductase. Son activité s’inscrit dans les réseaux de réponse aux xénobiotiques et dans l’homéostasie métabolique du foie, notamment les voies qui régulent l’équilibre rédox et la gestion des électrophiles. Des polymorphismes génétiques et des modifications d’expression de **CYP2A6** ont été associés à une variabilité des phénotypes de dépendance à la nicotine et à une sensibilité différente au stress tissulaire induit par des substances toxiques, ce qui étaye son intérêt en pharmacogénomique et en recherche en toxicologie.
CYP2A6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CYP2A6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CYP2A6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CYP2A6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CYP2A6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.