Plasmide Double Nickase (h) CYP2A13: sc-403450-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CYP2A13 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CYP2A13 Double Nickase (h) et le plasmide CYP2A13 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CYP2A13. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CYP2A13 | sc-403450-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CYP2A13 | sc-403450-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP2A13 code une monooxygénase humaine du cytochrome P450 qui catalyse le métabolisme oxydatif des xénobiotiques et de certains substrats endogènes, contribuant à la biotransformation de phase I. L’activité de CYP2A13 est associée au cycle d’oxydo-réduction et à la formation d’intermédiaires réactifs susceptibles d’influencer les réponses cellulaires au stress oxydant ainsi que les processus en aval de dommages à l’ADN et de réparation. Elle est fortement exprimée dans les tissus des voies respiratoires, où elle participe à l’activation métabolique et à l’élimination des composés inhalés et des toxiques environnementaux. Les variations d’expression ou de fonction de CYP2A13 ont été étudiées en lien avec les différences interindividuelles de métabolisme des xénobiotiques et la susceptibilité aux physiopathologies pulmonaires associées aux toxiques.
CYP2A13 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CYP2A13 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CYP2A13. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CYP2A13. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CYP2A13.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.