Plasmide Double Nickase (h) CYP11B2: sc-405281-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CYP11B2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CYP11B2 Double Nickase (h) et le plasmide CYP11B2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CYP11B2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CYP11B2 | sc-405281-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CYP11B2 | sc-405281-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP11B2 code la synthase de l’aldostérone, une enzyme mitochondriale du cytochrome P450 qui catalyse les étapes finales d’oxydation convertissant la 11‑désoxycorticostérone en aldostérone dans les cellules de la zone glomérulée de la surrénale. Son activité relie la stéroïdogenèse dérivée du cholestérol au système rénine–angiotensine–aldostérone, en intégrant le transfert d’électrons mitochondrial, la mono‑oxygénation dépendante de l’hème et le contrôle endocrinien de l’homéostasie des électrolytes et de la pression artérielle. Une expression ou une activité dérégulée de CYP11B2 est associée aux états d’excès d’aldostérone, notamment l’hyperaldostéronisme primaire et les adénomes surrénaliens producteurs d’aldostérone, et contribue à la physiopathologie cardiovasculaire et rénale. En tant que marqueur et acteur de la biosynthèse des minéralocorticoïdes, CYP11B2 est largement étudié dans la différenciation des cellules surrénaliennes, la signalisation de l’angiotensine II et le flux métabolique des stéroïdes.
CYP11B2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CYP11B2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CYP11B2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CYP11B2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CYP11B2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.