The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.
cyclin G1双切口酶质粒(h): sc-402045-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- cyclin G1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- cyclin G1双切酶质粒（h）和cyclin G1双切酶质粒（h2）编码针对CCNG1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：cyclin G1: sc-8016，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
cyclin G1双切口酶质粒(h) | sc-402045-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cyclin G1双切口酶质粒(h2) | sc-402045-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCNG1 编码细胞周期蛋白 G1（cyclin G1），这是一种由 p53 在转录水平调控的非典型细胞周期蛋白，负责将细胞周期控制与细胞应激反应相协调。Cyclin G1 参与检查点调控以及蛋白磷酸化网络的调节，其中包括影响 MDM2–p53 反馈回路的相互作用，以及与磷酸酶相关的信号通路（如 PP2A 相关复合物）等。通过这些途径，CCNG1 影响细胞增殖、基因组稳定性及对 DNA 损伤的应答，因此与肿瘤生物学、对基因毒性应激的耐受以及人类疾病中异常细胞周期调控等研究密切相关。多种癌症类型中均观察到 CCNG1 表达或调控的改变，支持其作为解析应激适应性信号机制的关键节点。
cyclin G1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CCNG1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CCNG1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CCNG1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CCNG1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。