Plasmide Double Nickase (h) CXCR-7: sc-403187-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CXCR-7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CXCR-7 Double Nickase (h) et le plasmide CXCR-7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ACKR3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CXCR-7 | sc-403187-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CXCR-7 | sc-403187-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACKR3 code pour le récepteur atypique des chimiokines CXCR-7, un récepteur « type GPCR » à sept domaines transmembranaires jouant un rôle de récepteur-piège (scavenger) qui se lie à CXCL12 et CXCL11 et module la disponibilité des chimiokines plutôt que d’activer la signalisation classique via Gαi. En modelant les gradients de CXCL12 et en établissant des interactions fonctionnelles avec CXCR4, CXCR-7 influence la chimiotaxie, les programmes de survie cellulaire, la biologie endothéliale et la migration cellulaire au cours du développement, avec des effets en aval sur des voies telles que ERK/MAPK et une signalisation biaisée dépendante de la β-arrestine. Une activité altérée d’ACKR3/CXCR-7 a été associée à une dérégulation du trafic leucocytaire, à des microenvironnements inflammatoires, au remodelage vasculaire, ainsi qu’à la migration et aux métastases des cellules tumorales, ce qui en fait une cible fréquemment étudiée dans la biologie des réseaux de chimiokines.
CXCR-7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ACKR3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ACKR3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ACKR3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ACKR3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.