Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CUG-BP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-401383-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CUG-BP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CUG-BP1 Double Nickase Plasmid (h) e il CUG-BP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CELF1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CUG-BP1 Antibody (3B1): sc-20003
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CUG-BP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401383-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CUG-BP1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401383-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CELF1 codifica CUG-BP1, una proteina legante l’RNA che regola lo splicing alternativo, la stabilità dell’mRNA e la traduzione riconoscendo elementi ricchi in GU nei trascritti bersaglio. Coordina la regolazione genica post-trascrizionale in processi quali il controllo del ciclo cellulare, le risposte allo stress e la differenziazione, intersecandosi con le vie di processamento dell’RNA e con la dinamica degli mRNP citoplasmatici. Un’attività di CELF1 deregolata è stata collegata a programmi di mis-splicing dell’RNA e ad alterazioni della proteostasi, con rilevanza per disturbi che coinvolgono tossicità dell’RNA associata a ripetizioni e, più in generale, anomalie nella regolazione del trascrittoma. Nelle cellule umane, le reti dipendenti da CUG-BP1 rappresentano un punto di accesso gestibile per analizzare come lo splicing e il turnover dell’RNA plasmino il fenotipo.
CUG-BP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CELF1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CELF1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CELF1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CELF1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.